正如《专家共识》所说，日本于2009年最先报道耳念珠菌，患者是东京一名70岁女性。国际抗真菌监测计划（SENTRY）中一组罕见念珠菌的调查显示，2009年之前耳念珠菌的分离极少，2004-2015年4大洲复核的15271株分离株中，只有4株为耳念珠菌。美国于2015年报道该菌，引起关注。回顾性复核发现1996年韩国已分离出耳念珠菌的临床菌株。与2015-2017年平均值相比，美国2018年临床病例数共有323 例，增长了318%。除此之外，耳念珠菌又称为“超级真菌”，因为它具有耐多药和高度传播的特点。一些临床分离株甚至对所有三种主要的抗真菌药物（唑类、多烯类和棘白菌素类）都有耐药性。2019年，美国CDC将耳念珠菌列入紧迫威胁名单。

2018年，从北京一例76岁住院的高血压肾病综合征女性患者中分离到中国首例耳念珠菌。从患者的支气管肺泡灌洗液分离到菌株，用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)进行鉴定，并用内部转录间隔区(ITS)扩增产物进行测序，得以验证。有趣的是，菌株对所有的抗真菌药物的最低抑制浓度（MIC）均较低。在一项回顾性研究中，中国沈阳的一家综合医院发现了15例耳念珠菌，这些菌株最初误诊为希木龙念珠菌，所有分离到的耳念珠菌均对氟康唑耐药，但对其他抗真菌药物的MIC值较低。何其相似的鉴定结果和药敏结果，我才突然发现，热点就在我身边。

对于一线工作人员，我首先关注的是流行病学。正如《专家共识》提“皮肤可携带该菌，不造成感染，但可传播给其他人。ICU可以发生获得性感染。该菌致死率高。风险因素包括高龄、糖尿病、手术、化疗、慢性肾病透析、HIV感染、机械通气、使用导尿管、中心静脉导管、动脉导管、肠外营养、抗细菌药物或抗真菌药物、插管（呼吸管、喂食管等）。概括而言，该菌可引起重度感染，多重耐药时导致治疗困难，容易播散，可以引起暴发。”看到这里好像有点儿懵，第一反应竟然是——一切皆有可能。细细再看，也有一丝疑惑，血液系统疾病是否需要单独列出，是归为化疗还是相关资料较少？

其次关注的是形态学和如何鉴定。很可惜，该菌镜下形态学无特征性提示，需要菌落分纯后进行菌种鉴定。耳念珠菌通常为卵圆形或长圆形酵母孢子，耐高温高盐，《专家共识》针对微生物鉴定从三个方面进行阐述：

1. 疑似耳念珠菌的提示，念珠菌在25 ℃不形成假菌丝，42~45 ℃能够生长，且当真菌错误鉴定为希木龙念珠菌、葡萄牙念珠菌、Candida duobuhaemulonii、无名念珠菌、胶红酵母、清酒念珠菌或鉴定结果不确定、链状念珠菌时，需要考虑。甚至于可能错误鉴定为白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌。当念珠菌对唑类等多重耐药或对两性霉素B耐药时，也需要考虑。

2. 分离鉴定技术中提到，Vitek 2 YST 8.01版本可以鉴定耳念珠菌；该版本鉴定的希木龙念珠菌、C. duobuhaemulonii，需要进一步判断是否耳念珠菌。而 BD凤凰念珠菌鉴定卡、MicroScan、生物梅里埃API 20C、RapIDYeast Plus不能鉴定该菌。显色培养基不能最终鉴定。耳念珠菌在沙保弱琼脂培养基上菌落为白色或奶油色，在CHROMagar平板上为粉色或米黄色，培养第4天可变为淡粉红色或紫色。MALDI-TOF MS：布鲁克质谱仪，MALDI Biotyper CA system（版本4）或 Bruker RUO数据库（2014【5627】及以上版本数据库）可以鉴定该菌。生物梅里埃质谱仪，MS IVD 3.2版本（IVD）或MS Saramis 4.14及以上版本（RUO）可以鉴定该菌。在分子生物学方法方面，纯菌的鉴定，推荐用26S rDNA D1/D2区域或内转录间隔区（inter-nal transcribed spacer，ITS）序列作为菌种鉴定的目标引物。

ITS

上游引物：5'-GTCGTAACAAGGTTAA CCTGCGG-3'，

下游引物：5'-TCCTCCCTTATTGATATGC-3'。

26S rDNA D1/D2区

上游引物：5'-GCATATCAATAAGCGGAG GAAAG-3'，

下游引物：5'-GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3'

基于上述引物进行PCR扩增和测序，结果须可重复、可验证、可比较。和GenBank数据库中基因序列相比，序列比较一致性超过98%，认为是同一个菌种。与耳念珠菌表型相近的希木龙念珠菌、葡萄牙念珠菌、Candida duobushaemulonii鉴别时，可考虑采用实时PCR（real-time PCR）方法。

耳念珠菌特异性引物：

F：5'-CGCACATTGCCTTGGGTA-3'；

R：5'-GTAGTCCTACCTGATT TGAGGCGAC-3'。

耳念珠菌及相关种属（耳念珠菌、希木龙念珠菌、葡萄牙念珠菌、C. duobushaemulonii）特异性引物：

上游引物：5'-GCGATACGTAGTATGACTTGCAGACG-3'；

下游引物：5'-CAGCGGTAGTCCTACCTGA-3'。

3. 原始标本的分子生物学检测，以耳念珠菌ITS2基因为靶标，用实时荧光PCR（TaqMan探针法）检测临床样本中的耳念珠菌，引物及探针序列如下。

ITS2基因特异性

引物F：5'-CAGACGTGAAT CATCGAATCT-3'，R：5'-TTTCGTGCAAGCTGTAATTT-3'，

探针P：5'-FAM-AATCTTCGC-ZEN-GGTGGCGTTGCATTCA-IFO-3'。

bicoid基因特异性

引物F：5'-CAGCTTGCAGACTCTTAG-3'，R：5'-GAATGACTCGCTGTAGTG-3'，

探针P：5'-Quas570-AACGCT TTGACTCCGTCACCCA-IRQ-3'。

鉴定之后自然就是抗真菌药物敏感性试验。在明确系耳念珠菌导致的感染时，《专家共识》推荐对所有耳念珠菌分离株进行药敏试验。非感染时，多重耐药耳念珠菌的分离有感控意义。推荐采用CLSI宏量肉汤稀释法为参考方法，测试5-氟胞嘧啶、唑类、棘白菌素类、两性霉素B的MIC。

第四关注的是院内感染监测和控制。《专家共识》提到：耳念珠菌可以黏附在医疗器械和环境表面。耳念珠菌环境筛查范围包括各类ICU、血液或实体器官移植病区、肿瘤病区、外科病区，上述病区医护人员接触的床、床垫、家具、水槽、椅子、床头柜、把手以及电话、工作台面、手推车、键盘、呼吸机面板、心电图导线、血压监测仪袖口等。对耳念珠菌分离病区的患者，或曾经定植或感染耳念珠菌的患者进行病原菌监测；分离阳性时要进行动态监测。采集标本包括腋窝、腹股沟以及先前感染部位拭子。定期评估（每3个月1次）已知耳念珠菌定植的患者是否去定植，有助于确定感染控制措施的持续时间，评估部位至少包括腋窝、腹股沟以及先前培养阳性的部位（如尿液和痰）。患者若口服抗真菌药，应停药1周再监测，如果局部用药则至少48 h后再监测。如结果阴性则1周后复查，阳性则继续监测。对耳念珠菌分离病区的工作人员，或曾经处置耳念珠菌定植或感染患者的工作人员，采集腋窝和腹股沟拭子，进行病原菌监测：阳性时进行持续性监测。必要时，扩大病原菌监测范围至耳念珠菌定植或感染患者接触者，分离阳性时进行持续监测。确定检出耳念珠菌时，应报医院感染管理部门。

综上可知，到目前为止中国的耳念珠菌感染有几个特点。

中国对耳念珠菌的临床和基础研究相对有限，还有许多有待解决的问题。例如，中国的耳念珠菌的原始来源是什么？鉴于难以准确鉴定该菌株，我们能否改进临床耳念珠菌分离和鉴定的技术？应该采取什么措施来防止群体性感染和院内或院内传播？目前抗真菌药物在临床环境中的应用是否与耳念珠菌的出现有关？就其毒力和抗真菌药物耐药性而言，耳念珠菌是否正在迅速进化？

最后，欢迎大家学习、实践中华医学会检验分会临床微生物学组撰写的《成人耳念珠菌感染诊治防控专家共识》，我们随时讨论。