壹生资讯-今日技能|耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测

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2021-06-13作者：论坛报小璐资讯

呼吸非原创

1.定义

苯唑西林最低抑菌浓度（MIC＞2mg/L或mecA基因阳性的金黄色葡萄球菌被定义为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。

2.耐药机制

青霉素结合蛋白是细胞壁合成时必需的转肽酶，同时也是β-内酰胺类抗菌药结合的靶位，MRSA携带mecA基因，可编码产生低亲和力的青霉素结合蛋白（PBP2a），阻止药物与靶位的结合而造成耐药。

除mecA外，新发现的mecC也可介导苯唑西林耐药。mecC介导耐药的菌株对苯唑西林和头孢西丁的耐药程度也在mecA介导耐药范围内，但是mecC介导的耐药菌株不能检出mecA及其编码产生的PBP2a，建议以基因检测为准。

3.检测方法

MRSA的检测，可采用含6mg/L苯唑西林的筛选平板快速筛查，也可通过常规药敏试验（苯唑西林MIC，头孢西丁MIC或纸片法）检测，或mecA及其产物PBP2a阳性均提示MRSA。

纸片法：用头孢西丁纸片法（30μg）检测MRSA，见表1.

表1 头孢西丁纸片法检测MRSA
抗菌药物（纸片含药量）	微生物群	抑菌环直径/mm R	抑菌环直径/mm S	注释
头孢西丁（30μg）	金黄色葡萄球菌和路登葡萄球菌	≤21	≥22	头孢西丁对金黄色葡萄球菌纸片扩散法抑菌环直径≤21mm应报告对苯唑西林耐药，≥22mm应报告对苯唑西林敏感
头孢西丁（30μg）	除路登葡萄球菌外的凝固酶阴性葡萄球菌	≤24	≥25	头孢西丁对凝固酶阴性葡萄球菌纸片扩散法抑菌环直径≤24mm应报告对苯唑西林耐药，≥25mm报告对苯唑西林敏感

（2）琼脂平板快速筛选法：用苯唑西林筛选MRSA，见表2。

表2 苯唑西林琼脂稀释法检测MRSA
筛选试验	苯唑西林耐药
培养基	含NaCl的MH琼脂（4%W/V；0.68mol/L）
抗菌药物含量	6mg/L苯唑西林或10mg/L甲氧西林
接种	直接菌落悬液约0.5麦氏比浊管，用拭子浸润菌悬液后，在平板表面点种或划线
培养条件	35℃空气
培养时间	24小时，对于甲氧西林/苯唑西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌，孵育48小时后再检测最为可靠
结果	＞1菌落=耐药
推荐质控菌	金黄色葡萄球菌ATCC29213-敏感，金黄色葡萄球菌ATCC43300-耐药

4.结果解释

金黄色葡萄球菌或所有凝固酶阴性葡萄球菌如对苯唑西林（或甲氧西林）耐药，则对青霉素类、头孢菌素类（头孢罗膦除外）、碳青霉烯类和含酶抑制剂的复方制剂均应报告耐药，而不考虑其体外药敏结果。

本文首发于人卫药学节选自《耐药革兰阳性球菌感染诊疗手册》

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