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通过雾化吸入高渗盐水诱导患者咳出痰液,以检测痰液的炎症细胞总数及细胞分类结果,明确患者气道炎症类型和程度,协助诊治及预后观察。
高渗盐水雾化方法可采用单一浓度法(NaCl溶液浓度:3.0%或4.5%)或梯度浓度法(NaCl溶液浓度:3%、4%、5%),重症哮喘或儿童患者可采用生理盐水雾化以减少不良反应。临床使用推荐采用单一浓度法进行超声雾化。
试剂:高渗盐水,0.1%二硫苏糖醇(DTT)及苏木素-伊红或Diff-Quik染色液等。
检测仪器:超声雾化器或压缩雾化器、水浴箱、漩涡或水平振荡器、低速离心机、细胞离心涂片机和正置光学显微镜等。
(1)单一浓度法:①诱导前10 min让患者吸入沙丁胺醇400 μg,告知患者检查的注意事项及配合方法。②10 min后清水漱口、擤鼻。③高渗盐水(3.0%或4.5%)雾化吸入10 min,漱口、擤鼻后主动用力咳痰至培养皿。④若患者无痰或痰量不足则重复步骤③,直至咳出足量合格痰标本或雾化总时间达30 min时均终止雾化。
(2)梯度浓度法:①诱导前10 min让患者吸入沙丁胺醇400 μg,告知患者检查的注意事项及配合方法。②10 min后清水漱口、擤鼻。③3%高渗盐水雾化吸入15 min,漱口、擤鼻后主动用力咳痰至培养皿。④若患者无痰或痰量不足则换用4%高渗盐水继续雾化8 min。⑤若患者无痰或痰量不足则换用5%高渗盐水继续雾化7 min后终止诱导程序。⑥雾化期间如患者咳出足量合格痰标本或雾化总时间达30 min时均终止雾化。教会患者主动用力深咳及检查人员给予叩背排痰均能有效提高诱导成功率。
痰液咳出后,检查人员应立即用尖嘴镊子挑取合格痰标本,挑取标本时推荐在显微镜下选取白细胞聚集而鳞状上皮细胞少的痰标本,条件不具备时,可挑取肉眼下密度较高、不透明的痰栓,并去除透明清亮的唾液。标本应及时进行处理,4 ℃存放不应超过3 h。处理时视痰标本黏稠度加入2~4倍体积的0.1%的DTT充分混合室温下裂解15 min,液化痰液,37 ℃水浴和水平温和震荡可提高液化效果,液化完成后的痰液用48 μm滤膜/300目尼龙滤网过滤杂质,滤液以常温离心10 min(1200×g),弃上清液后磷酸盐缓冲液(PBS)重悬沉淀细胞,血细胞计数板计数痰细胞总数,细胞悬液可进行手工涂片或利用细胞离心涂片机进行制片,细胞涂片自然风干,甲醛等固定液中固定。固定后进行HE染色或Diff-Quik染色,光镜下对400个以上的炎症细胞(中性粒细胞、嗜酸粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞)和气道上皮细胞进行分类计数,结果以各种细胞的百分比来显示。
(1)如患者可自行咳出合格痰标本(鳞状上皮细胞/全部痰细胞的比例<30%),则不需要进行高渗盐水雾化。
(2)重症哮喘、哮喘急性发作或慢阻肺急性发作的患者需联合肺功能及临床症状综合判断是否适合进行高渗盐水雾化。当患者第一秒用力呼气容积(FEV1)占预计值%<60%或经皮血氧饱和度(SpO2)<90%或喘息症状、呼吸困难明显时,建议让患者自然咳痰或行生理盐水雾化诱导。
(3)实验室须备有哮喘急性发作等不良反应的抢救指引、设备和药物,雾化过程中密切观察患者表现,监测患者的血氧饱和度及肺功能情况。
(4)激素类、抗过敏药、茶碱等药物可能会对检查结果造成影响,需要停药3 d以上,但在观察治疗随访效果时,检查期间可不停药。
符合以下要求是检验诱导痰细胞学检查合格与否的关键点。
(1)不同疾病的患者主动咳痰成功率存在差异,但经高渗盐水雾化后诱导痰标本的留取成功率应>80%。
(2)痰细胞活力应>75%。
(3)镜下的细胞涂片中痰细胞应分布均匀、不聚集,且细胞的形态与完整性良好。
(4)细胞涂片中鳞状上皮细胞占总体细胞的比例应<30%。
(1)近期有活动性咯血者。
(2)气胸或纵隔气肿。
(3)各种原因引起的大量胸腔积液或心包积液。(4)严重心功能不全。
(5)呼吸系统传染病。
节选自《咳嗽的诊断与治疗指南(2021)》
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