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梅毒、布鲁菌病、疟疾感染相关病原学指标的临床意义

2022-10-19作者：论坛报木易资讯

感染原创

10天常用感染指标判读手册

《肠道、虫媒传染病需要查哪些相关病原学指标？》问题：

① 婴幼儿感染性腹泻常见的病原体是什么？为明确诊断需要做哪些检查？

答案：婴幼儿感染性腹泻常见的病原体是轮状病毒。为明确诊断可检测粪便标本中轮状病毒抗原或用PCR方法检测病例粪便/呕吐物中轮状病毒核酸，也可用粪便或呕吐物进行轮状病毒分离培养并用中和试验鉴定病毒。

② 文中提到的蜱虫叮咬引起发热、血小板减少的传染病有哪些？该如何做病原学检查明确诊断？

答案：可引起的疾病及相应检查：①发热伴血小板减少综合征，由新型布尼亚病毒感染引起，可行新型布尼亚病毒IgG抗体检测、PCR检查病毒核酸或行病毒培养；②无形体病，是嗜吞噬细胞无形体感染引起，可行嗜吞噬细胞无形体IgM/IgG抗体、血细胞特异性核酸或病原体分离。

本期作者：深圳市第三人民医院邹容容

审校：深圳市第三人民医院袁静

阅读要点

目前梅毒、布鲁菌病的血清学检查较多，掌握不同血清学检查对疾病的临床诊疗具有重要意义。对于梅毒和布鲁菌病重点掌握其血清学检查对临床的意义；而对于疟疾，则主要掌握疟原虫核酸检测和疟原虫抗原快速诊断检测对疾病的临床意义。

目前梅毒在临床上并不少见；布鲁菌病在南方亦有增多趋势；对于口岸城市来说，疟疾的输入也不容忽视。掌握各种实验室检查对疾病的诊断和治疗具有重要意义。

本文介绍了梅毒的暗视野显微镜检查、镀银染色检查或核酸扩增试验以及非梅毒螺旋体血清学试验（如甲苯胺红不加热血清试验）和梅毒螺旋体血清学试验（如梅毒螺旋体颗粒凝集试验）；布鲁菌细菌培养、分子生物学检测以及血清学检查如实验室初筛试验的虎红平板凝集试验和平板凝集试验，实验室确诊试验的血清凝集试验；疟疾的外周血涂片显微镜检测、疟原虫核酸检测及疟原虫抗原快速诊断检测。

梅毒相关检查对诊断和治疗的意义

暗视野显微镜检查、镀银染色检查或核酸扩增试验

取硬下疳损害渗出液、淋巴结穿刺液或刮取二期梅毒皮损如扁平湿疣、湿丘疹渗液，采用暗视野显微镜或镀银染色检查；或采用核酸扩增试验检测梅毒螺旋体核酸。

该类检查主要适用于一期、二期梅毒，目前临床使用较少。如该类检查阳性则可确诊，如治愈后则为阴性。

非梅毒螺旋体血清学试验：

包括性病研究实验室试验（VDRL）、快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）。它们均采用抗心磷脂抗体，敏感性和特异性基本相似。

目前临床上常用TRUST，梅毒感染发病时该抗体可呈阳性，治愈后转阴或低滴度阳性，如经规范治疗后滴度下降不明显，需注意排除有无神经梅毒、心血管梅毒可能。该检查是梅毒螺旋体感染的筛查试验。

少数患者在正规抗梅治疗后，非梅毒螺旋体抗体滴度下降至一定程度即不再下降，且长期维持在某一滴度范围（甚至终生），即为血清固定现象。TRUST定量试验稀释度越高，说明病情可能相对比较严重，或者是处于早期。如感染不足6周，该类试验可为阴性，阴性者如高度怀疑一期梅毒可于感染6周后复查。

梅毒螺旋体血清学试验

包括梅毒螺旋体荧光抗体吸收试验(FTA-ABS)、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（ELISA）、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）。它们检测体内梅毒特异性抗体，是判断是否感染过梅毒的重要检测指标。

目前临床上常使用TPPA，临床治愈后IgG型抗体可终身保持阳性。如感染不足4周，该试验亦可为阴性，阴性者如高度怀疑一期梅毒可于感染4周后复查。

布鲁菌病相关检查对诊断和治疗的意义

细菌培养

血液、骨髓、脓性分泌物、关节液、脑脊液等均可作细菌培养，其中血液最常用。如培养阳性可确诊布鲁菌病，但培养若未见细菌，应延长培养时间或重新送血培养，如为阴性亦不能排除布鲁菌感染，可结合临床、流行病学史及血清学等各方面综合判断，给予诊断和治疗。

分子生物学检测

针对布鲁菌基因的PCR可以用作培养产物的菌种鉴定，也有直接用于临床标本鉴定，可用作确诊，治愈后PCR阴性。

血清学试验

1) 实验室初筛试验：

包括虎红平板凝集试验（RBPT）、平板凝集试验（PAT）、胶体金免疫层析试验（GICA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）。

目前临床上主要使用RBPT、PAT，其主要优势是方便快捷，可在5～10 min内获得结果，推荐用作快速筛查试验。该方法基于布鲁杆菌细胞膜上的光滑脂多糖（S-LPS）产生的抗体，在非暴露人群中敏感度高，假阳性率低。但流行区高背景抗体效价会影响其诊断价值，且由于与其他革兰阴性菌的交叉反应，可出现假阳性结果。布鲁杆菌慢性感染和有并发症的患者可能出现较高的假阴性率。阳性结果须由其他血清学试验确认。

2) 实验室确诊试验

①　血清凝集试验（SAT）：检测所有针对布鲁杆菌S-LPS抗原的凝集性抗体(包括IgM、IgA、IgG)。对产生症状的急性感染患者更加敏感，灵敏度随病程时间延长而下降，在复发患者、流行区或暴露者中特异度较低。SAT存在与其他菌种抗体的交叉反应，如结肠耶尔森菌O:9、大肠埃希菌O:157、兔热病杆菌、霍乱弧菌等，可导致检测假阳性。国内将效价1∶100并出现显著凝集(液体50%清亮)及以上，或病程1年以上效价1∶50并出现显著凝集及以上；或半年内有布鲁杆菌疫苗接种史，效价达1∶100并出现显著凝集及以上者，可作为确诊试验之一。目前临床上主要使用SAT，经有效治疗后SAT效价会降低。

②　补体结合试验（CFT）：多用于动物感染诊断，不适合在小实验室进行。效价1∶10并出现显著凝集及以上作为确诊试验之一。

③　抗人免疫球蛋白试验（Coomb’s）：可同时检测凝集或非凝集性抗体，由此能更早产生阳性结果，且治疗恢复后保持阳性的时间也更长，灵敏度高。较之SAT，该检查更适合用于慢性、有并发症、复发和持续性感染患者的检查，但对技术和设备都有一定要求。目前效价1∶400并出现显著凝集及以上可作为确诊试验之一。

疟疾相关检查对诊断和治疗的意义

外周血涂片显微镜检测

取外周血涂制厚、薄血片，采用吉氏或瑞氏染色后，显微镜油镜检测疟原虫。检查以厚血片为主，薄血片主要用于虫种鉴别。血涂片疟原虫显微镜检测是WHO推荐疟疾诊断的“金标准”，不仅能确定疟原虫感染和判别疟原虫种，还能识别疟原虫虫期和原虫密度，协助重症疟疾救治。经有效治疗后外周血涂片疟原虫密度会逐渐降低直至阴性。

疟原虫核酸检测

采用PCR方法从患者血液中检测疟原虫特异性基因，该方法不仅能进行虫种的鉴别，还可以用于疟原虫抗药相关基因的检测，具有特异性、敏感性高的特点。

血清学试验

该检测具有检测简便、快速的特点。不同快速诊断试纸条的敏感性和特异性有很大差异。其中以富组氨酸蛋白2/富组氨酸蛋白3（HRP2/HRP3）为靶抗原的诊断试纸条对恶性疟原虫检测敏感性和特异性较高，但不能检测其他疟原虫虫种；以乳酸脱氢酶为靶抗原的诊断试纸条可检测恶性疟原虫或非恶性疟原虫，但不能区别间日疟原虫、卵形疟原虫和三日疟原虫，且对低原虫密度的检测敏感性稍差。疟原虫快速诊断试纸（RDT）不能用于判定抗疟治疗效果，经有效治疗后RDT仍会持续阳性一段时间。