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作者:首都医科大学宣武医院 林娟 朴月善 卢德宏
本文重点阐述癫痫标本中海马组织的取材规范以及病理分型诊断,旨在帮助提高癫痫病理诊断的规范性和准确性。
海马硬化(Hippocampal Sclerosis,HS),又称作颞叶内侧硬化、切迹硬化及Ammon角硬化等,是难治性颞叶癫痫中常见的病理类型。
选择性手术切除颞叶和海马组织是外科治疗颞叶癫痫患者的重要方法。其中海马组织标本的送检、取材是否规范以及病理诊断水平,直接影响临床的精准诊疗质量,也会影响后续癫痫标本的保存和科研分析。
因此,本文重点阐述癫痫标本中海马组织的取材规范以及病理分型诊断,旨在帮助病理医师提高癫痫病理诊断的规范性和准确性。
海马结构位于颞叶内侧面的基底部,是边缘系统的重要组成部分。海马结构包括海马(又称Ammon角)和齿状回两部分, 海马和齿状回像两个U字形相互交锁,一个固定于另一个之中。海马位于侧脑室颞角的底壁,呈弓状隆起,分为头、体、尾部三个区域。
海马的细胞结构分为分子层、锥体细胞层和多形细胞层,在冠状位上,海马分为 CA1、CA2、CA3和CA4区。组织学上CAl区由小锥体细胞组成3层皮层结构,对缺氧最敏感;CA2区是由大锥体细胞组成的狭窄、致密的条带,对缺氧最为耐受,病变常不累及;CA3区是由锥体细胞形成的松散条带区,CA4被齿状回包绕,由大、小锥体细胞松散排列组成,二者对缺氧中度耐受。
癫痫外科在手术中切除海马组织后,应该用稍微潮湿的生理盐水纱布覆盖标本,或将标本放入专门的平皿中,做好标识,并立即与病理科联系。标本运送时应置于冰桶中,同时保证标本的完整性。
①病理医师收到标本后,首先应对患者的基本信息进行核对,再对标本进行登记、编号。
②对送检标本进行肉眼观察、肉眼描述和拍照。肉眼观察应当仔细观察海马的方位、大小、质地和颜色,同时做好测量和详细的记录。拍照要求背景干净,标尺清楚,标本摆放有序,标本表面干净,光源充足,对焦清晰,尽量保证照片的质量。如标本方位难以辨认需及时和手术医师进行沟通。
③垂直于海马的长轴和/或侧脑室壁,每隔3~5 mm沿冠状面依次切开,沿一致方向依次排开观察病变情况并拍照。从排开的第一片标本开始,每隔一片取材,对病变的重点区域可连续多切面取材。
④选取部分新鲜组织,置于-80℃冰箱冻存。
⑤剩余组织固定于10%中性福尔马林中,做好标记,保存至标本库。
⑥被取材的标本放进取材盒,固定于10%中性福尔马林中2天后,常规进行脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色和封片等程序。
2013年,国际抗癫痫联盟(ILAE)将HS组织学分为3型:Ⅰ型指神经元缺失和胶质细胞增生以CA1和CA4区为主,CA2、CA3区和齿状回等也不同程度受累,该型约占60%~80%;Ⅱ型病理改变以CA1区为主;Ⅲ型则以CA4区为主。
神经元丢失程度判定原则:CAl-CA4区残存神经元数量<正常海马的25%视为重度丢失,介于25%~75%之间为中度丢失,>75%为轻度丢失。
我们可以运用Neun免疫组化染色来观察海马组织中神经元的残存情况。另外,HS的标本中,还会有不同程度的齿状回颗粒细胞弥散、缺失。
HS的MRI表现为海马体积减小,T2加权像信号增强,内部结构紊乱等。部分TLE患者的影像学改变非常类似HS,但病理学上并无神经元缺失,仅有胶质细胞轻度增生,该组又称为“没有海马硬化仅伴有胶质细胞增生(no-HS)”。因此,我们要更正临床工作中的一些误区,比如勿要将影像学诊断中的“海马萎缩”等同于病理学诊断中的“海马硬化”。
图1 A:癫痫外科送检海马组织;B:垂直于海马的长轴和/或侧脑室壁,每隔3~5 mm沿冠状面依次切开;C:海马组织未见神经元缺失;D:图C的Neun染色;E:CA1区神经元重度缺失,CA3及CA4区神经元中度缺失;F:图E的Neun染色。
小结
在颞叶癫痫行手术切除的海马组织中,约有60%~70%的患者存在HS。研究表明,不同类型的HS患者其病因及预后明显不同。因此,对HS进行正确取材和诊断非常重要。希望此文可以帮助病理医师更好地掌握癫痫海马标本。
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