研究3：

T1DM免疫治疗新靶点探索：DHCR7调控CD8⁺T细胞代谢与功能

T1DM源于胰岛β细胞的自身免疫性破坏，导致进行性胰岛素缺乏。免疫治疗可保护部分患者的β细胞功能，但临床获益差异较大，治疗抵抗仍是常见挑战。研究旨在寻找与治疗应答相关的早期免疫特征及潜在调控靶点。

研究分析接受抗CD3免疫治疗患者的纵向整体RNA测序和单细胞RNA测序数据，以明确与治疗应答相关的早期免疫特征，并识别影响疗效的细胞与分子因素。随后采用流式细胞术及细胞外通量分析，评价抑制7-脱氢胆固醇还原酶（DHCR7）对人CD8⁺ T细胞功能和代谢的影响，最后在STZ诱导的糖尿病模型及NOD小鼠中检验靶向DHCR7的治疗作用。

抗CD3治疗启动后6个月内的外周血免疫基因表达模式，能够区分治疗应答者与无应答者。单细胞分析提示，一类胆固醇缺乏的CD8⁺ T细胞亚群是影响治疗应答的重要因素。作为胆固醇生物合成相关酶，DHCR7发挥代谢与免疫检查点作用，调节T细胞干细胞样状态与耗竭状态之间的平衡。

体外研究显示，在CD8⁺ T细胞活化过程中抑制DHCR7，可增加耗竭相关特征，并降低葡萄糖摄取和糖酵解活性。机制研究提示，阻断DHCR7降低细胞内胆固醇水平，增强Ⅰ型干扰素信号，从而促进耗竭样状态形成。

在体内实验中，药理性抑制DHCR7延迟了STZ诱导糖尿病模型的发病；在NOD小鼠中，则增强抗CD3治疗效果，减轻胰岛炎并改善总体治疗获益。

早期外周血免疫特征可为预测免疫治疗应答及患者分层提供依据。DHCR7作为代谢与免疫检查点，调节CD8⁺ T细胞干细胞样状态与耗竭状态之间的平衡。现有机制与动物实验结果提示，靶向DHCR7可能成为减少治疗抵抗、改善免疫调节治疗应答的研究方向。

研究4：

T1DM免疫损伤机制：IL-21促进致病性CD56⁺CD8⁺T细胞反应

研究旨在探索IL-21如何通过ERK1/2信号通路驱动CD56⁺CD8⁺ T细胞分化与活化，进而介导胰岛β细胞损伤，并评价阻断IL-21信号在T1DM中的潜在治疗价值。

研究从T1DM纵向队列的新诊断患者、部分缓解期患者、缓解结束后患者及健康对照者中采集外周血样本。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清IL-21水平，以流式细胞术评估CD56⁺CD8⁺ T细胞比例及表型，并分析其与代谢指标的相关性。

体外实验采用重组IL-21刺激CD8⁺ T细胞，在加入或不加入IL-21受体Fc融合蛋白（IL-21R Fc）的条件下，观察CD56表达的诱导情况，以验证作用特异性；采用Seahorse分析评估细胞代谢。体内实验对环磷酰胺加速发病的NOD小鼠经尾静脉注射IL-21R Fc，分析糖尿病发生率、胰岛炎严重程度及胰腺引流淋巴结中CD8⁺ T细胞的效应功能。

新诊断T1DM患者的循环CD56⁺CD8⁺ T细胞显著增多，在缓解期下降，缓解结束后再次升高。其比例与血糖呈正相关，与β细胞功能呈负相关。血清IL-21水平随疾病阶段动态变化，并与CD56⁺CD8⁺ T细胞比例呈正相关（r=0.5，P<0.001）。

体外实验显示，IL-21可诱导CD56⁺CD8⁺ T细胞分化，该效应可被IL-21R Fc阻断。在NOD小鼠中，IL-21R Fc治疗明显延迟糖尿病发病、降低累积发生率、减轻胰岛炎，并抑制CD8⁺ T细胞产生干扰素γ（IFN-γ）。

研究提示，IL-21–ERK1/2–CD56⁺CD8⁺ T细胞轴参与T1DM相关免疫损伤。在所研究的动物模型中，阻断IL-21信号可减轻胰岛炎并延缓疾病进展，为将IL-21作为潜在免疫治疗靶点提供实验依据。