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染色大全之苏木素 | 内镜色素的使用及配制方法

2021-08-25作者:论坛报小塔资讯
内镜非原创

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苏木素


我们现在常用苏木素进行实体显微镜的染色观察。

微信图片_20210816101346.jpg


实体显微镜观察的实例步骤


①为了防止被切除的标本自己溶解,要把标本快速地用福尔马林进行固定。这时,用不锈钢的大头钉将标本伸展开,固定到发泡苯乙烯(泡沫塑料)或者胶板上。

微信图片_20210816101349.jpg


②福尔马林最少固定12小时。


③首先用注射器认真清洗标本,除去附着在病变表面的黏液。


微信图片_20210816101351.jpg



④然后用稀释的卡拉基氏苏木素染色10秒。


微信图片_20210816101353.jpg


⑤再次水洗。


⑥追加30秒卡拉基氏苏木素染色。


⑦浸润在水下观察。

微信图片_20210816101400.jpg


⑧在实体显微镜观察下,切开病变,切开后照相。这样就可以实体显微镜所见和病理组织一对一观察了。

微信图片_20210816101402.jpg


实体显微镜观察时的注意点:


① 一定要照下带标记的照片。


② 为了照出清楚的照片,染色不要太浓,照到病变部位的光源如果是多束光的话,会照出明亮且清晰的照片。为了更好地显示平坦病变表面微小的凹凸变化,要考虑到光源的方向。增强从一个方向出来的光,其他从不同角度来源的光则留下清晰的阴影,这样能够得到很好的图像。


③手术标本病变非常大的情况下,要将标本放入大的托盘内,在水浸润下用放大内镜进行观察。

微信图片_20210816101408.jpg


术前肠道ESD的观察:腺体间质的观察中,当放大内镜观察腺管开口部的形态(рit形态)的不规则性与黏膜下癌(sm)浸润度的关系不确切时,有时pit形态尚规整,由于sm深部浸润的病变,重新观察其龙胆紫染色后的放大像后发现没有注意到本来应该染成深紫色的pit与pit之间的部分,基本上没有被染出颜色。由于pit的轮廓部分已被染色,所以pit的形态看得很清楚,但这之外的部分被染成不均匀深紫色了。 


这些pit与pit之间的部分为黏膜病变所覆盖的被覆上皮,它的正下方直接与黏膜固有层间质相连。而且,如果是sm浸润癌,则其可通过断裂的黏膜肌层之间的空隙与浸润部间质相连。像pit与腺管直接连接一样,也可以说pit与pit之间的部分和间质(stroma)直接连接。根据这些,将这个部分也就是意味着“与间质连接的部分”叫作stromal area (SA),将SA的龙胆紫染色形式分为3类(见下图)。




a:染色适度,SA被染成均一的深紫色。 

b:染色性低下,SA染色低下呈不均匀的斑块状(b-1),然而染色更低时,仅pit周围勉强被染成深紫色(b-2)。 

c:染色性消失,几乎没有被染成深紫色的,pit周围也几乎染不上颜色。

研究SA pattern发现, SA pattern 反映了sm浸润所引起的病变浅层组织变化,同时也反映了sm浸润度。 


下图为SA的实例。SA pattern 中“染色性正常”的a为黏膜内癌,“染色性低下” 的b和“染色性消失”的c是sm深部浸润癌。



文章首发自中日早癌早诊早治

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