成人细胞遗传学正常的急性髓系白血病（CN-AML）是最常见的血液恶性肿瘤之一，其遗传背景及临床预后具有高度的异质性，按照欧洲白血病网（ELN）危险度分级，仍有部分被评估为预后较好的患者会复发，复发仍然是严重制约其长期预后的关键因素，根本原因在于精准诊断和个体化治疗仍存在盲区。发现并验证新的复发相关分子标志物，是推动其精准诊疗的关键途径之一。

在我们前期开展的工作中（Blood. 2018;132, Supplement 1:2813），通过对23例复发成人CN-AML患者初诊、缓解及复发时期三重配对的骨髓DNA样本进行全外显子组测序，筛选出多个潜在的AML复发相关基因，其中包括鲜见报道的DDX11基因突变（图1）。DDX11基因编码一种铁硫簇DNA解旋酶，促进染色质结构的维持和DNA的修复，在维持基因组稳定中起到重要作用。已有报道DDX11双等位基因突变导致一种罕见的常染色体隐性遗传病－华沙断裂综合征。DDX11体细胞突变与骨髓增生异常综合征和淋巴系统肿瘤的不良生存有关。然而，目前关于DDX11突变对AML预后的影响鲜见报道。

我们在前期研究的基础上，进一步研发出包含DDX11在内的236个基因高通量靶区测序Panel，借助于该Panel对423例初诊CN-AML骨髓DNA样本进行高深度基因序列分析，发现DDX11突变在CN-AML中频繁发生，DDX11突变组患者更多地集中在ELN危险分层的中危组。多因素预后分析表明，DDX11突变与较高的累积复发率、较差的总生存相关（表1，图2）。通过对部分家系口腔黏膜样本的联合基因序列分析，证实部分DDX11突变为胚系突变（图3），这对白血病患者精准诊疗及全球应用最广泛的半相合干细胞移植实施“北京方案”中优选供者，以提高患者生存期，具有重要的意义。该研究结果于2023.11.22在线发表于Leukemia（Q1）。

图1. 1例AML患者从初诊到第一次巩固化疗后复发再到移植后复发的克隆演变过程，其中DDX11的获得性突变为化疗后复发的特异性突变之一。

——Zhou YL, Huang XJ, Ruan GR*, et al. Blood. 2018; 132 （Supplement 1）: 2813.

图 2. DDX11突变对CIR和RFS的影响。A. DDX11野生型和突变型队列的CIR。B. DDX11野生型和突变型队列的RFS。C. DDX11野生型、体细胞突变型、胚系突变型队列的CIR。D. DDX11野生型、体细胞突变型、胚系突变型队列的RFS。

图3. DDX11突变位点及变异等位基因频率（VAF）。A. DDX11在初诊时的突变位点：不同的突变类型由图形标识，不同图形的个数表示该位点突变的病例数，图形颜色表示突变类型；B. VAFs的分布：每行表示一个样本的数据；根据VAFs，VAFs > 30%的突变被认为是可能的胚系突变（红色），而VAFs < 30%的突变可能是体细胞突变（蓝色）。

表1. DDX11突变对CIR和RFS影响的多因素分析

阮国瑞研究员：

随着研究的不断深入，越来越多的分子学标记得以发现，助力成人细胞遗传学正常的急性髓系白血病这一具有临床和分子生物学背景高度异质性的疾病亚群的精准诊疗。

本研究在前期研究的基础上进一步扩展，首次发现DNA解旋酶DDX11基因在成人细胞遗传学正常的急性髓系白血病中与较高的复发风险相关，为临床诊疗提供参考依据。另一方面，本研究通过家系成员口腔颊黏膜对照样本及不同诊疗时期样本中突变负荷分析，发现部分DDX11突变为潜在的胚系突变，亦与不良预后相关，这对急性髓系白血病患者精准诊疗以及全球应用最广泛的半相合干细胞移植实施“北京方案”中优选供者，以提高患者生存期，具有重要的意义。

但本研究尚存在一定的局限性：1.回顾性分析资料，患者接受化疗或移植并非完全随机；2. 临床队列相对还不够大，阳性病例例数尚需进一步积累以更好的分析DDX11突变组患者特异性临床特征。因此，本研究的结论尚需在更大的前瞻性临床队列研究中进一步验证。

该论文前期相关研究结果曾连续两年获得第60、61届美国血液学年会摘要成就奖：

1. Yalan Zhou, Lixin Wu, Robert Peter Gale, Runqing Lu, Jinlan Li, Hao Jiang, Qian Jiang, Bin Jiang, Zilong Wang, Tingting He, Yue Wang, Xiaoxiao Zhang, Xiaohui Zhang, Lanping Xu, Kaiyan Liu, Xiaojun Huang, Guorui Ruan*. Clonal trajectories in persons with acute myeloid leukemia and normal cytogenetics relapsing after intensive chemotherapy and after allotransplants. Does pretransplant conditioning contribute to mutation topography? Blood. 2018; 132 (Supplement 1): 2813.

2. Yalan Zhou, Lixin Wu, Robert Peter Gale, Zilong Wang, Jinlan Li, Hao Jiang, Qian Jiang, Bin Jiang, Sanbo Cao, Ying Sun, Feng Lou, Chengcheng Wang, Yanrong Liu, Yu Wang, Yingjun Chang, Lanping Xu, Xiaohui Zhang, Kaiyan Liu, Guorui Ruan*, Xiaojun Huang*. Dead/H-box helicase 11 (DDX11) mutations correlate with increased relapse risk in persons with acute myeloid leukaemia and promote proliferation and survival of human AML cells in vitro and in immune deficient mice. Blood. 2019;134 (Supplement 1): 2732.

该论文前期相关研究结果已申请两项专利，其中一项已授权并转化：

1. 一种对NPM1基因突变细胞遗传学正常的急性髓系白血病患者危险分层的装置（受理号：202211170341.4），发明人：黄晓军，阮国瑞，赵鸣悦，曹雷茗。

该团队依托国家血液系统疾病临床医学研究中心，北京大学血液病研究所，阮国瑞研究员作为国家血液系统疾病临床医学研究中心PI，其课题组长期致力于血液肿瘤分子标记物基础与临床研究。在国际上首先发现两种新的NPM1突变、八种新的CALR突变、急性髓系白血病中存在DDX11突变、多种新的淋系及多发性骨髓瘤分子标记物。研发的多种新的分子标记物及其检测技术目前已在临床广泛应用，极大地促进了血液肿瘤精准诊疗的发展。