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目前国内针对ESD标本的病理学检查无统一规范性指南。我们参照WHO诊断标准、美国病理医生学会、欧洲、日本胃癌研究会有关胃癌标本病理学检查的指南,整理出我们对早期ESD标本规范化病理学检查的建议草案。ESD标本病理评估,除需要确定病变的病理类型外,更需要关注病变的切缘是否干净,浸润深度及有无脉管浸润等。
(一)标本预处理
1.冲洗:用生理盐水将标本表面的血液及黏液冲洗干净,充分暴露病变。
2.延展:沿着标本最外侧将蜷曲的标本展平后用不锈钢细针(推荐使用昆虫标本针或针灸针)固定于塑料泡沫或橡胶板上。若断端距离病变3 mm以内,禁止在此处钉针,以避免机械破坏影响对病变的观察。标明其在体内的相对位置(如口侧、肛侧、前壁、后壁等)]。
3.固定:标本放在平板上展平后,立即浸泡于10%的福尔马林溶液中固定,通常情况下,应在室温下浸泡12~48 h。固定液体积不少于标本体积的5倍。
(二)大体检查
1.照相、测量、描述、记录:拍摄大体照片至少两张(取材前全貌和取材切割图)。仔细观察标本,测量、记录组织信息,包括标本的大小、病变大小、形状、颜色、硬度、水平边缘、肉眼分型(巴黎分型)。
2.全面取材:确定切缘后,沿着病灶边缘至标本外侧缘最短距离的连线开始切片,然后平行于这条线连续切片,间隔为2.0~3.0 mm。
3.组织脱水、包埋:取材结束后将翻转好的组织条按顺序放入包埋盒,每盒≤3条,并记录放置顺序。组织脱水、浸蜡、石蜡包埋,切片厚度4~6 μm。
需描述肿瘤的大体形态、大小、病理组织学分型、分化程度、淋巴管和血管浸润、肿瘤浸润深度、黏膜状态和切缘情况以及有无脉管浸润,以确定内镜下切除是否达到完全切除或者是否还需要补充治疗,此外还需记录辅助检查结果,如免疫组织化学HER2蛋白等的表达状态,利用免疫组化确定少见组织类型,如神经内分泌癌等。
显微镜下需观察内容:
1.有无溃疡及周围黏膜:溃疡及瘢痕影响ESD手术及对预后的判断。周围黏膜的非肿瘤性改变(包括炎性反应、萎缩、化生等改变)。
2.组织来源和分型标准:有无上皮内瘤变,不确定的上皮内瘤变,低级别上皮内瘤变,高级别上皮内瘤变(原位癌可疑浸润癌,黏膜内浸润癌),黏膜下浸润癌(日本和西方标准不同)。
3.组织学类型及分化程度:多种组织病理学类型同时存在时,应记录每种类型并按照其对应面积大小以降序排列。
4.肿瘤浸润深度:肿瘤的浸润深度应该以病灶浸润的最深层记录。若肿瘤浸润至黏膜下层,需要测量病灶最深处至黏膜肌层(可通过免疫组化Desmin协助显示)下缘距离。胃肠道不同部位肿瘤对于SM1的界定标准不同,胃<500 μm,超过以上深度则为SM2。若病灶因为溃疡或溃疡瘢痕而使黏膜肌层不易辨认,可通过画一条虚线连接临近残存黏膜肌层假想为完整之黏膜肌层,再通过测定肿瘤下缘至该线的距离来记录黏膜下肿瘤浸润深度。
5.切缘状态:切缘干净是指在切除组织的各个水平及垂直切缘未见到肿瘤细胞。切缘阴性:若肿瘤距切缘较近,则应记录癌灶距切缘的最近距离。水平切缘阳性:记录阳性切缘块数。垂直切缘阳性:记录肿瘤所在部位。
6.脉管浸润:可借助特殊染色和免疫组化。亚甲蓝和苏木精-伊红(HE)双重染色以及弹力纤维染色的免疫组化检查可用于识别静脉,而抗淋巴管内皮抗体(D2-40)则用于淋巴管的识别。VG染色和CD31或CD34免疫组化染色也广泛用于血管和淋巴管浸润的鉴定。
图1 测量大小;图2 ESD标本病变全貌图 注:虚线为病灶边缘距离水平切缘(外侧缘)最近处的切线,“4”号实线为第一次切片的切线,需垂直于虚线;通过固定标本的拍照,可以重建肿瘤侵犯深度(黑色代表黏膜层累及,红色代表黏膜下层累及)和在黏膜内扩散的范围,“1”~“8”为标本的切线;图3A ESD标本固定后的处理和对于肿瘤扩散程度的重建示意图;3B ESD 标本取材;图4 HE染色
内容节选自《胃内镜黏膜下剥离术围手术期指南》
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