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对于急危重症患者要掌握mNGS的适应证。有关急危重症感染患者mNGS的应用原则、注意事项、操作流程和临床解读见图1。根据目前的临床经验、研究结果和mNGS技术的优势,推荐mNGS在急危重症感染患者中应用的主要适应证:
① 病情危重需要尽快明确病原体;
② 特殊病人如免疫抑制宿主、合并基础疾病、反复住院的重症感染患者需要尽快明确病原体;
③ 传统微生物检测技术反复阴性且治疗效果不佳;④ 疑似新发病原体、临床上提示可能有一定的传染性;
⑤ 疑似特殊病原体感染;
⑥长期发热和/或伴有其他临床症状、病因不明的感染。符合以上适应证的患者,应尽快送标本进行检测。
图1 急危重症感染患者mNGS的应用原则、注意事项和报告解读流程
(1)背景菌
在阅读报告时,要结合采集样本类型、微生物背景、患者的临床特征、传统的病原体检测报告和辅助检查等判断是定植菌、背景菌还是致病菌。对于mNGS的检测报告,检测机构必须尽可能提供检测列表,而不是做出判断,由临床医生结合检测结果和临床病史做出判断。
(2)胞内菌/真菌检出率低
对于胞内感染菌因释放到体液中含量较少而导致检测敏感性偏低,比如结核分枝杆菌、军团菌、布鲁菌等。但是随着检测技术的优化与样本类型选择的逐渐完善,mNGS诊断胞内菌感染的敏感性越来越高。另外,mNGS对具有较厚细胞壁的病原微生物如真菌感染,其核酸提取效率较低,导致临床检出率和敏感性较低。
(3)RNA病原体的检测
由于人体RNA转录本身具有比基因组更高的丰度和复杂度,另外RNA容易降解,对运输和保存的要求较高,因此RNA病毒的临床检测还存在一定的困难,尚需要不断优化RNA病毒的送检流程。
(4)耐药检测
目前使用mNGS进行药敏检测还存在一定的困难,一是目前报道的耐药基因型与耐药表型的关联程度还存在一些差距;二是现有检测方法因成本考虑导致耐药相关基因覆盖度较低,难以高灵敏度地检测出相关耐药基因,随着技术进步,耐药基因高覆盖度的mNGS检测技术将会形成。
本文节选自《宏基因组分析和诊断技术在急危重症》
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