近日，第五届全国艾滋病学术大会在昆明开幕。来自国内外3000多名学术界人士齐聚一堂，交流分享中国乃至世界艾滋病及相关疾病防治最新信息、成果与进展，共同分析探讨其新挑战与新趋势。此次大会是中国性病艾滋病防治协会举办年度艾滋病学术大会以来，涉及专业领域最广、设置专题论坛最多、安排大会报告时间最长的一次学术盛会，除主会场外，还设有13个分论坛及多场卫星会议。在本次会议上，南昌大学第一附属医院邹薇教授同与会者分享了《HIV-1 Nef 细胞间转移在HIV-1/HCV相关肝脏疾病中的生物学意义》。

在本次会议上，南昌大学第一附属医院邹薇教授同与会者分享了《HIV-1 Nef 细胞间转移在HIV-1/HCV相关肝脏疾病中的生物学意义》。

因为具有相同的感染路径，HIV-1/HCV共感染率很高：约15-30%的HIV-1感染者共感染了HCV。高效抗逆转录病毒治疗（ART）的使用极大地改变了HIV-1感染的自然病程，肝脏疾病已成为HIV-1/HCV共感染者死亡的主要原因。多个流行病学研究发现：HIV-1本身是促进HIV-1/HCV感染者肝脏疾病进展的一个重要原因。然而，共感染导致肝脏疾病加速进展的分子机制还不清楚。因此，揭示HIV-1介导的肝脏疾病进展的分子机制是重要的。

HIV-1是否能在肝细胞中复制还存在争议，HIV-1进入所需的受体和协同受体在肝细胞表面的表达水平也同样存在争议。我们的前期结果明确表明HIV-1至少不能在肝细胞株中有效复制，表明HIV-1介导的HCV复制上调和肝脏疾病加速进展可能是因为HCV感染的肝细胞和特异的HIV-1病毒蛋白之间直接或间接地、细胞内或细胞外相互作用的结果。但到底是何种病毒蛋白在HIV-1介导的肝脏疾病中起最重要的作用还需进一步研究。因此，明确肝细胞中HIV-1复制和/或HIV-1病毒蛋白是否是肝病加速进展的首要原因是迫切需要解决的问题。

因为肝细胞不支持HIV-1复制，我们设想HIV-1 Nef通过形成导管或外泌体被转移至肝细胞而实现与肝细胞的交流。因此，我们通过使用Tetracycline(Tet)可诱导nef表达的Jurkat细胞，首先研究了Nef是否能被从表达细胞转移至目标肝细胞。我们发现Nef诱导Jurkat细胞形成导管，并且这些导管从Jurkat细胞延伸至HCV亚基因组复制细胞-RLuc中，而Jurkat细胞中单纯的GFP表达并不能形成导管。并且，当Nef.GFP表达细胞与RLuc细胞共培养24小时后，目标肝细胞RLuc中能检测到转移的Nef，表明Nef确实从Jurkat细胞转移到了肝细胞。流式细胞仪检测发现这种转移的效率约为5-16%。我们还构建了Δnef-HIV-1作为阴性对照，检测了Nef从野生型（wt）HIV-1感染的Jurkat细胞到肝细胞的转移，发现从wt HIV-1感染的Jurkat细胞中产生的Nef在Huh7.5.1细胞中被检测到，表明感染细胞分泌的Nef被转移至肝细胞。我们已有的结果表明Nef没有包装进外泌体，提示外泌体不参与这个过程中Nef的转移。我们对石蜡包埋的HCV单一感染和HIV-1/HCV共感染患者的肝组织标本进行了Nef的检测，发现Nef确实存在于共感染患者的肝组织中，而没有从HCV单一感染的肝组织中检测到，提示Nef被从HIV-1感染细胞转移到了肝细胞中。因此，Nef也许是HIV-1/HCV共感染中最有可能促进肝脏疾病进展的病毒蛋白。Nef是HIV-1编码的附属蛋白之一，具有多种功能。

基于前期结果，我们设想HIV-1 Nef细胞间转移通过调控HCV复制和改变肝细胞生物学加速HIV-1/HCV共感染患者的肝病进展。我们在转染Nef的Huh7.5.1细胞中以及使用不同数量的Nef-表达Jurkat细胞与Huh7.5.1细胞共培养确认了转移的Nef对上调HCV复制的影响。

我们还发现Nef转染入Huh7.5.1细胞导致细胞内和细胞表面SR-B1（scavenger receptor B1）的表达增强。SR-B1的表达水平对HCV的感染性至关重要，因为SR-B1介导胆固醇的转运和流出以及受体介导的内吞。与此一致地是，Nef增加了肝细胞中脂滴的大小和数量。因此，我们推测转移的Nef通过上调SR-B1的表达可能促进HCV的复制，并改变未感染肝细胞对HCV的易感性。

我们还发现Nef和HCV都能促进肝细胞中ROS的产生，且两者有协同作用。通过增加pErk-1,2 和STAT3的表达，Nef和HCV影响了肝细胞中的信号转导通路，从而改变了肝细胞的生物学特性。

总结如下：1）肝细胞不支持HIV-1复制。在感染HIV-1的细胞和感染HCV的肝细胞之间转移的Nef参与了HIV-1/HCV相关肝脏疾病的发病机制；2）Nef促进了肝细胞中HCV的复制；3）通过影响HCV感染的肝细胞中脂质的运输和分布、SR-B1的合成、ROS的产生以及pErk1/2等信号转导通路，Nef改变了正常肝细胞的生物学特性，导致了肝脏疾病的发生。

（中国性病艾滋病防治协会供稿）