艰难梭菌是引起抗生素相关性腹泻和医疗机构相关性腹泻的重要病原，在欧美引起暴发流行，造成沉重疾病负担。然而我国艰难梭菌感染调查缺乏统一的诊断原则和检测技术规范，我国艰难梭菌感染率和疾病负担尚不明确。因此中国CDC传染病预防控制所联合全国其他11家单位撰写《艰难梭菌感染诊断(T/CPMA 008-2020)》中华预防医学会团体标准，以“合法性、科学性、先进性、可行性”为原则，给出了艰难梭菌感染的危险因素、诊断原则、诊断和鉴别诊断。旨在提高临床感染性腹泻中艰难梭菌感染诊断的准确性，指导监测工作开展，明确我国艰难梭菌感染的风险和疾病负担。

难辨梭状芽孢杆菌(艰难梭菌)是一种严格厌氧、产芽孢、革兰阳性杆菌，是引起抗生素相关性腹泻和医疗机构相关性腹泻的重要病原。艰难梭菌感染（CDI）的主要临床表现为腹泻，也可伴有腹痛和发热等。轻-中度感染仅为腹泻或自限性感染，重度感染可致死，会伴有伪膜性肠炎（PMC）、中毒性巨结肠、肠穿孔和脓毒血症等。美国CDC 2017年数据显示，美国每年CDI患者近23万人，其中死亡人数超1.2万，产生超10亿美元的疾病负担，被列为抗生素相关的紧迫公共卫生威胁之一。欧美地区已形成一系列成熟的监测、诊断、治疗和干预评价的指南和报告体系。近10年来的调查研究显示，我国CDI呈快速增长趋势，然而由于缺乏统一的诊断原则和检测技术规范，我国CDI率和疾病负担尚不明确。

感染性腹泻是丙类法定传染病的重要组成，艰难梭菌作为其病原之一，已引起国内学者的重视。已有研究显示，腹泻患者中产毒艰难梭菌的检出比例高达14%；也有研究显示，社区获得性腹泻患者中产毒艰难梭菌的核酸水平检出率同样为14%，培养阳性率约为5%~6%。但是，这些数据是基于文献回顾，或是在某些特定区域、特定人群开展，且应用的检测方法和流程都各不相同；此外，临床医生对CDI的认识不足，这些因素都导致很难得出我国CDI的可靠比例和疾病负担。

因此，为了规范CDI流行病学调查，提高艰难梭菌诊断的准确性，亟须制定适用于各级医疗机构和疾病预防控制机构的CDI诊断标准，对其诊断原则和流程做出科学明确的方法学规定，进一步推动普及感染性腹泻中艰难梭菌的诊断，指导早期治疗，避免并发症，降低疾病负担，以及应对潜在的高毒株（RT027）暴发风险具有重要意义。

本标准遵循“合法性、科学性、先进性、可行性”原则，按照GB/T 1.1-2009和中华预防医学会团体标准制订规范要求，在我国专业艰难梭菌实验室的大量实验数据和学术论文的基础上，结合国际相关团队的研究报道，建立标准操作规程（SOP），并在全国CDI调查和监测中进行验证和评价，获得有代表性的应用数据。标准制订过程中，广泛征集专家（临床医生以及科研院校和CDC研究人员）意见，并接轨国际同类指南。

标准制定过程中参考了国际艰难梭菌研究领域的权威论著、国内艰难梭菌调查研究数据和结果。在重要的病例定义、诊断原则和临床表现分级等参考了欧洲CDC、欧洲微生物学会（ESCMID）、美国CDC、美国感染病学会（IDSA）和美国健康流行病学学会发布的相关指南，并结合标准编制专家在实际工作中常用的方法等综合讨论而制定，兼顾了国际的统一性和国内的适用性。

包括目次、前言、引言、范围、术语和定义、缩略语、诊断依据（危险因素、临床表现、内镜检查和实验室检查）、诊断原则、诊断（临床诊断病例和确诊病例）、鉴别诊断、附录A、B、C和参考文献。将诊断分为两级，明确确诊的标准，并与其他常见病原感染腹泻进行鉴别诊断。附录A是资料性附录，阐述样本核酸检测的详细实验流程。附录B是规范性附录，明确艰难梭菌分离培养和鉴定的详细实验流程。附录C用于鉴定高毒株RT027和RT078。

（1）诊断依据：包括危险因素、临床表现、内镜检查和实验室检查。艰难梭菌是抗生素相关性腹泻的主要病原，目前公认CDI的危险因素主要有抗生素使用、老年（>65岁）、住院等。危险因素的提出有助于引导临床医生在腹泻患者中意识到CDI的可能性，从而提高CDI的诊断率。对临床表现的严重程度进行了分级，参照了IDSA的指南，有助于临床治疗策略的选择。同时，对标欧美CDC的相关指南，并结合我国临床实际工作，将内镜检查列为诊断依据之一。在实验室检查中详细阐述了样本采集保存、快速检测以及分离培养鉴定的技术方法，包括新的鉴定技术，如质谱等。
（2）诊断原则和诊断：根据危险因素、临床表现、内镜检查和实验室检查进行诊断。结合国内外现行的诊断指南，将诊断病例分为“临床诊断病例”和“确诊病例”两级。临床诊断病例是指在排除其他原因的腹泻后，如果出现上述危险因素和临床表现，高度提示CDI，需进行进一步检查。确诊病例是指在临床诊断病例的基础上结合内镜检查发现PMC或者实验室检查产毒艰难梭菌阳性，确诊病例的诊断标准与国际通用指南保持一致，符合CDI感染的病例定义。
（3）鉴别诊断：CDI引起的腹泻，属于感染性腹泻的范畴，因此与细菌性痢疾、肠侵袭性大肠埃希菌腹泻、沙门菌腹泻、轮状病毒腹泻和诺如病毒腹泻等相鉴别。同时，还应排除有腹泻症状的其他肠道疾病，如肠易激综合征和炎症性肠病等。

（1）实验室检测中可采用无须培养针对样本的直接检测。

为提高临床检测效率，可应用免疫学快速检测和核酸检测粪便样本中有无产毒艰难梭菌。免疫学快速检测直接采用商品化的试剂盒对样本中的谷氨酸脱氢酶（GDH）抗原和毒素A/B同时进行检测，在结果判读时需注意，如果GDH和毒素A/B同阳，有产毒艰难梭菌；同阴，无产毒艰难梭菌；一阴一阳则需要结合PCR检测tcdB基因，tcdB+则样本中存在产毒艰难梭菌，tcdB-则样本中无产毒艰难梭菌。样本的核酸检测是指对疑似CDI的腹泻样本，无须培养，提取样本DNA进行艰难梭菌特异的细胞毒素基因tcdB核酸片段检测，如果阳性，说明样本中存在产毒艰难梭菌，可采用附录A中的方法或者商品化的试剂盒。

（2）分离培养是接种在不同的选择性培养基上厌氧培养获得可疑克隆后，完成后续产毒鉴定来确定的。

推荐先进行样本的前处理，再涂板培养，可有效提高分离效率。常用的前处理方法有等体积无水乙醇室温孵育30 min，或者80 ℃加热10 min。

（3）注意鉴别高毒株RT027和RT078型。

RT027已引起欧洲和北美地区的暴发流行，我国也有RT027检出的报道，需引起高度重视。RT078与动物源艰难梭菌和社区获得艰难梭菌高度相关，随着CDI流行病学的变迁，其公共卫生学意义日益重要。我们前期的研究和国际相关报道都指出仅凭多位点序列分型、毒素谱鉴定和tcdC基因上的碱基缺失，不能准确判断RT027和RT078型，应开展核糖体分型来有效识别高毒株。

（4）诊断和鉴别诊断。

本标准根据国际儿科协会的相关文献报道，明确<2岁婴幼儿出现腹泻，不推荐进行CDI的相关检查。IDSA的指南中指出，<1岁婴幼儿出现腹泻，不推荐进行CDI的相关检查，<2岁婴幼儿出现腹泻，除非有暴发的风险或其他高度提示的危险因素，否则不推荐进行CDI的相关检查。ESCMID则规定为<3岁婴幼儿出现腹泻，不推荐进行CDI的相关检查，除非高度怀疑暴发相关。轻-中度CDI的临床表现不具有特异性，需引起临床医生的足够重视，同时注意与其他病原的感染性腹泻和以腹泻为主要症状的其他肠道疾病相鉴别。

（5）实验室检测的质量控制。

实验室检测用的试剂和操作流程都应有严格的质量控制体系。尤其是样本快速检测中的胶体金法、普通PCR和荧光PCR的核酸检测，都应建立标准品，定期对实验试剂和流程进行评估，同时还应进行必要的室间评价，保证实验结果的可重复性和稳定性。

作者：吴媛，卢金星，闫中强，刘运喜，古文鹏，伏晓庆，徐英春，吴安华，黄海辉， 宗志勇，金大智，赵建宏，陈烨，刘卫平，李卫光

文章首发自中华流行病学微平台（账号主体：中华预防医学会）