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真菌直接镜检操作简便、适用于多种临床样本[支气管肺泡灌洗液(BALF)、痰液、尿、粪、分泌物、脑脊液、引流液等]、可快速报告结果,有重要临床价值,但存在假阴性、敏感性不高等问题。
怀疑真菌感染患者BALF及无菌体液(除血液外)标本,应做真菌直接镜检,同时做真菌培养及血清学检查。
非无菌部位标本(痰、尿、粪等),如果做真菌培养,需要在培养同时做真菌直接镜检。
真菌直接镜检敏感性不高,多次送检能提高检出率。
活检组织标本在进行组织病理和真菌培养检查的同时,应做直接压片,荧光染色后进行真菌直接显微镜检查。
荧光染色可显著提高真菌镜检的敏感性,临床应用价值更大,但需要注意:在皮肤、呼吸道等非无菌部位,荧光染色检查发现个别孢子有可能是定植真菌,非致病真菌,需要结合临床综合判断。呼吸道标本的直接涂片镜检也可以采用革兰染色。怀疑肺孢子菌肺炎的患者,对诱导痰或BALF涂片后进行六胺银染色(GMS)。怀疑隐球菌性脑膜炎患者,脑脊液直接真菌镜检一般采用墨汁染色。
真菌直接镜检报告阴性,由于敏感性问题,不能完全排除真菌感染。报告阳性时,如果是无菌部位标本,可以确诊存在真菌感染,但确认致病真菌种类还需要真菌培养结果;如果是非无菌部位,则需要结合患者免疫状态、临床表现、真菌培养结果及真菌血清学检查综合判断;BALF来源于肺部,非完全无菌部位,但免疫抑制人群(尤其是血液病、骨髓移植、化疗患者)出现阳性结果,且根据镜检时真菌形态提示为曲霉时,对诊断肺曲霉病有重要意义;对于痰、尿、粪等非无菌标本,真菌直接镜检阳性,根据形态提示念珠菌时,要考虑局部真菌定植问题。鼻窦组织标本由于培养阳性率较低,更建议做真菌直接镜检。少量肺部穿刺组织直接压片,进行荧光染色后镜检,可快速发现肺部曲霉或毛霉等丝状真菌感染,有确诊意义,适用于高度怀疑肺部真菌感染患者。
真菌直接镜检中真菌形态的描述对某些菌种有提示意义,但不能替代真菌培养。
本文节选自《侵袭性真菌病实验室诊断方法临床应用专家共识》
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