RSV感染，危害有多大？

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV) 是一种反义单链RNA病毒，是导致世界5岁以下儿童住院的最主要呼吸道病原，每年有66000至234,000名婴幼儿死于RSV感染。其主要通过鼻咽黏膜或眼黏膜接触含病毒的分泌物或污染物而传播。直接接触是最常见的传播途径，但气溶胶飞沫也可引起传播。在我国的季节性暴发一般出现在10或11月至次年4或5月，1月或2月为高峰期。

有RSV疫苗吗？现状如何？

目前尚无应用于临床的成熟RSV疫苗。20世纪60年代研发过一种RSV福尔马林灭活疫苗，但部分患儿注射后病情反而加重。RSV减毒活疫苗正在研发和测试中，但安全性和抗体活性尚待评估。同时，基于RSV融合(fusion, F)糖蛋白研发的亚单位疫苗，研究者们发现了一类新型的糖蛋白F特异性抗体，其效力至少是帕利佐单抗（Palivizumab）的100倍。帕利佐单抗是一种针对RSV F蛋白的人源化小鼠单克隆抗体，其预防严重RSV感染的有效性高达80％。它的半衰期相对较短（约20天），因此在RSV季节需要每月肌肉注射一次以提供保护。

RSV疫苗研究新进展：DS-Cav1

DS-Cav1是一种针对RSV病毒前融合蛋白F的疫苗。融合蛋白（F）是RSV的病毒表面蛋白（图1），其功能涉及病毒进入细胞的过程，而且拥有高度的序列保守性，故成为疫苗开发的主要目标蛋白。F蛋白有两个构相，分别为融合前（pre-F）和融合后（post-F）构相。传染性RSV的表面是同时拥有这两种构相的F蛋白，病毒感染细胞后pre-F构相会变构为post-F构相，故此时的病毒表面只有post-F构相。

图1 RSV的结构。RSV的RNA基因组由10个编码11种蛋白质的基因组成。这些蛋白包括两个非结构蛋白（NS1和NS2）；四种包膜蛋白：附着糖蛋白（G），融合蛋白（F），基质蛋白（M）和小疏水蛋白（SH）；以及五个核糖衣壳蛋白：核蛋白（N），磷蛋白（P），大RNA聚合酶（L），M2-1（锌结合转录抗终止剂）和M2-2（参与RNA复制与转录平衡的调节因子）转录）。就疫苗开发而言，最重要的蛋白质是F蛋白。RSV病毒体外壳中的F蛋白在RSV毒株中高度保守，使其成为极好的潜在疫苗靶标。F蛋白有两种形式，融合前和融合后。

研究证明，只有post-F构相的RSV感染性明显下降，换言之，pre-F比post-F构相更能代表活性RSV。福尔马林（甲醛水溶液）处理是一种古老的病毒灭活方法，但用福尔马林灭活的RSV（FI-RSV）会导致RSV病毒表面的pre-F转化为post-F（图2），这也解释了FI-RSV疫苗产生的抗体中和效力差的原因。热失活法，也被证明促进了F蛋白从融合前到融合后构象的快速不可逆转的转变。这些研究结果也为以后的RSV疫苗开发指明了方向，那就是针对稳定的pre-F构相开发疫苗。目前已发现部分基因突变可在病毒灭活时稳定pre-F构相，给DS-Cav1的设计创造了条件。

图2 用福尔马林处理病毒粒子以产生FI-RSV时，感染力和前F抗原性呈平行性丧失。

研究背景 

由于多种主动接种方法在降低婴儿和老年人因RSV引起的发病和死亡方面疗效不佳。需要一种能大幅和持续提高中和活性的疫苗来保护人们免受严重的RSV疾病侵害。为此，研究者评估了DS-Cav1的安全性和免疫原性，这是一种针对prefusion F蛋白的疫苗。

研究方法 

在这项随机、开放的1期临床试验中，评估DS-Cav1在18-50岁的健康成人中的剂量、安全性、耐受性和免疫原性。在第0周和第12周，参与者将被分组接受剂量分别为50μg，150μg或500μg的DS-Cav1疫苗，并在每个剂量组内以1：1的比例随机分配以接受含或不含氢氧化铝的疫苗（AlOH）佐剂。在将71名参与者随机分配之后，方案进行了修改，以允许一些参与者仅接受第一次疫苗接种（第0周）。主要目标为每次注射后28天内的安全性和耐受性。次要目标为评估接种后0~44周内的RSV中和活性和RSV F蛋白抗体水平。

研究结果 

95人入选接受DS-Cav1，剂量为50μg（n=30，其中n=15有AlOH）、150μg（n=35，其中n=15有AlOH），或500μg（n=30，其中n=15有AlOH）。DS-Cav1是安全的，耐受性良好，没有发现与疫苗相关的严重不良事件。单次接种后4周，DS-Cav1疫苗激发了强大的中和活性和结合抗体水平（P<0.0001）。在第44周的探索性终点分析中，与基线相比，所有组的RSV中和活性以及抗pre-F IgG水平都明显增加。剂量、接种次数或佐剂对中和活性没有长期影响。

结果解读 

在这项Ⅰ期研究中，DS-Cav1疫苗表现出良好的耐受性和安全性。DS-Cav1疫苗接种引起了RSV F蛋白特异性抗体和RSV中和活性的显著提升，并长期保持（至少44周内保持在基线以上）。一次低剂量的pre-F蛋白疫苗接种，可能会在整个RSV季节提供保护。以结构为导向的精确抗原设计给RSV疫苗的问世带来希望。

图3 DS-Cav1疫苗接种后的RSV中和活性

A和B显示了在第0、2、4、12、14、16、24和44周，用50μg、150μg或500μg的DS-Cav1免疫的参与者（每个剂量的佐剂组和未佐剂组合并），血清中对报告RSV A2病毒（RSV A）和RSV B18537病毒（RSV B）的中和活性。

C和D显示了在基线（第0周）和第4周以及第44周接种了50μg、150μg或500μgDS-Cav1疫苗的参与者血清中分别对RSV A和RSV B的中和活性。

E和F显示了接受两次（n=59）或一次（n=28）疫苗接种的参与者在第12周和第16周之间以及这些组在第12周和第44周之间对RSV A和B的中和活性的倍数变化。

<或pa或 style="font-size: 13px;">图4 DS-Cav1免疫后血清和黏膜抗体结合情况

不管是在普通情况下（A/C），抑或是在过量的Post-F蛋白存在（B）、帕利珠单抗使用下（E）等情况，DS-Cav1接种后均可产生良好的针对Pre-F的IgG和IgA抗体。且抗体和黏膜的结合情况良好（F/G）。

作者：王亚妮    审核：徐凯峰

编辑：程重生

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